A largada acontece na Praia de Ubatumirim. O percurso inicia com 1.7 km de areia, até o acesso à estrada de terra que leva à trilha para a Praia da Justa. Em seguida, os atletas percorrem 400 metros de trilha e mais 400 metros de areia na Praia da Justa, chegando ao acesso à trilha da Praia do Puruba, com aproximadamente 2.1 km de extensão. Ao final da trilha, ocorre uma travessia de cerca de 40 metros pelo Rio Quiririm, nesse ponto, os atletas podem optar por atravessar nadando, com apoio de guarda-vidas, utilizando corda e raia, colete salva-vidas, ou ainda fazer a travessia com o auxílio dos barcos da organização. Logo após a travessia, os atletas percorrem mais 100 metros até o 1º ponto de hidratação, localizado no campo de futebol do bairro do Puruba. Após a hidratação, há uma nova travessia de rio, com aproximadamente 200 metros, em água rasa (altura da canela, dependendo da maré), que pode ser realizada correndo ou caminhando. Na sequência, o percurso segue por 1.5 km de areia pela Praia do Puruba, mais 1 km de estrada de terra e outros 1.5 km de asfalto, até a Praia do Léo. Após essa praia os atletas percorrem cerca de 1.5 km, alternando entre estrada de terra e asfalto, até o 2º ponto de hidratação, localizado na Praia do Prumirim, nessa praia, são 700 metros de areia fofa, seguidos por 1 km de trilha, até alcançar a Praia do Félix, seguindo os atletas percorrem 1 km de areia até chegar ao trecho mais exigente da prova: a Trilha do Félix até Itamambuca, considerada a mais técnica do percurso. É fortemente recomendado o uso de tênis de trilha, devido à necessidade de maior aderência (grip). Essa trilha possui aproximadamente 4 km de extensão, até a chegada à Praia de Itamambuca com 2 km que em sua maior parte a areia é dura, até o 3º ponto de hidratação. Após esse ponto, ocorre uma nova travessia de Rio, o Itamambuca, ao lado do Resort Itamambuca. Apesar de ser uma travessia tranquila, o local conta com apoio de bombeiros e guarda-vidas, colete salva-vidas e barco de apoio. O percurso segue por aproximadamente 1.100 metros, alternando entre terra e asfalto, até acessar a Rodovia BR-101. Na rodovia, os atletas percorrem cerca de 2 km, até chegar à Praia Vermelha do Norte, nesta praia são 1.2 km de areia até o acesso à trilha do Saco da Mãe Maria, que possui aproximadamente 2.5 km de
extensão. Trata-se de uma trilha técnica, sendo fortemente recomendado o uso de tênis de trilha para maior segurança. Ao final da trilha, o percurso chega à entrada da Praia da Barra Seca, onde percorre cerca de 400 metros pela beira da água, com os pés molhados, seguidos de uma média de 900 metros de areia dura, até a travessia do Rio Indaiá. Dependendo da maré, o nível da água pode variar da altura da canela até a cintura. Nesse ponto, novamente haverá bombeiros, salva-vidas, barco e coletes salva-vidas, assegurando uma travessia segura. Após a travessia do rio, os atletas encontram o 4º ponto de hidratação. Em seguida, percorrem 2 km de areia dura até o acesso à trilha do Morro do 180, localizada em uma Unidade de Conservação. A trilha possui aproximadamente 1 km, com trechos de costeira, subidas acentuadas e uma descida rápida e inclinada. Ao final, o percurso chega à Praia do Matarazzo, onde os atletas seguem por 500 metros de asfalto, conectando-se às praias do Cruzeiro e, posteriormente, do Itaguá. Nesse trecho, ainda na Praia do Cruzeiro, está localizado o último ponto de hidratação. O percurso segue por 3.5 km de areia dura e mais 2 km de asfalto sentido Caizão até acessar a trilha, também situada em área particular e Unidade de Conservação. A trilha possui 1.8 km de extensão. Em seguida, os atletas percorrem mais de 1 km de asfalto e 2.150 metros alternando entre areia e asfalto pelas praias Vermelha do Centro e Tenório, até chegar à Praia Grande, onde completam o Desafio 28 Praias.

Superfície percorrida na prova:

• Areia – 36%
• Trilha – 35%
• Asfalto – 22%
• Terra – 5%
• Travessia de rio – 2%